ساخت پلاسمید pds۱۳۲::∆icsa جهت حذف هدفمند نواحی از ژن icsa به منظور تولید واکسن زنده تخفیف حدت یافته شیگلا
نویسندگان
چکیده
زمینه و هدف: واکسن های زنده تخفیف حدت یافته شیگلا پاسخ های امیدبخشی در ایجاد ایمنی حفاظتی در آزمایشات بالینی بر روی انسان را نشان داده اند. هدف از این تحقیق طراحی و ساخت پلاسمید pds132::∆icsa به عنوان یک ناقل انتحاری برای حذف هدفمند بخشی از ژن icsa در شیگلا می باشد. مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی، گونه و سرووار شیگلای جدا شده از نمونه های کودکان مبتلا به اسهال، در بیمارستان های فیروزآبادی و میلاد تهران، با استفاده از آزمایش سرم شناسی و واکنش زنجیره ای پلیمراز مورد تایید قرار گرفت. آغازگرهای شناسایی ژن icsa طراحی و سپس در حامل pgem-5zf همسان سازی و تعیین توالی گردید. بر اساس نقشه برش آنزیمی ژن icsa، 1751 جفت باز از ژن icsa با استفاده از آنزیم محدودکننده hincп حذف و ژن جهش یافته ∆icsa به طور موفقیت آمیزی ایجاد گردید. حامل pgem∆icsa با استفاده از آنزیم های sphi و sali هضم گردید و سپس در حامل انتحاری (psd132) همسانه سازی شد. صحت فرآیند با آزمایش های فنوتیپی و ژنوتیپی تایید گردید. یافته ها: سویه شیگلا دیسانتری تیپ1 با آزمایش سرولوژیکی و pcr تایید گردید. توالی ژن icsa سویه بومی با سویه های ثبت شده در بانک ژنی یکسان بود. حامل انتحاری pds132::∆icsa با در بر داشتن 1484 جفت باز، مشتق شده از ژن icsa می تواند به عنوان یک ناقل انتحاری اختصاصی در ایجاد تداخل در ژن icsa به کار رود. نتیجه گیری: استفاده از سیستم های انتحاری ایجاد جهش هدف مند را تسهیل و در مقایسه با سایر تکنیک های اولیه مانند پاساژ متوالی روش اختصاصی و موثرتری می باشد.
منابع مشابه
طراحی و ساخت حامل انتحاری pds۱۳۲::∆virg به منظور حذف ژن virg در شیگلا فلکسنری ۲a برای تولید سویه واکسنی زنده تخفیف حدت یافته شیگلا
زمینه و هدف: سویه های شیگلا باکتری های گرم منفی هستند که واجد توانایی ورود به درون سلول های غیر فاگوسیتیی، از طریق ترشح پروتئین های افکتور (که آنتی ژن های تهاجمی نامیده می شوند (ipas)) می باشند. یکی از مهمترین آنها پروتئینvirg است. واکسن های زنده تخفیف حدت یافته شیگلا، پاسخ های امیدوار کننده ای را در ایجاد ایمنی حفاظتی در مطالعات بالینی بر روی انسان از خود نشان داده اند. در شرایط حاضر، ساخت سوی...
متن کاملبررسی کارآیی واکسن زنده تخفیف حدت یافته برونشیت عفونی سویه B08IR/ا793 ساخت موسسه رازی
از واکسن‌هایی که در حال حاضر برای کنترل بیماری برونشیت عفونی طیور مورد استفاده قرار می‌گیرد، واکسن حاوی سویه i793/Bمیباشد. بدنبال اثبات حضور ویروس i793/B در اکثر مرغداری‌های کشور واکسن زنده تخفیف حدت‌یافته برونشیت عفونی سویه i793/B081R، در موسسه رازی تولید شد. هدف از انجام این پروژه ارزیابی کارآیی واکسن i793/B081Rبر اساس پروتکل OIE با استفاده از ارزیابی فعالیت مژک‌های نای (Ciliary activity) پر...
متن کاملهمسانه سازی ژن virG و ساخت سازه جهش یافته pGEM∆virG به منظور القای نوترکیبی در سویه شیگلا دیسانتری بومی
سابقه و هدف: بیماری شیگلوز از علل عمده ابتلا کودکان به اسهال در ایران است و ژن virG نقش کلیدی را در بیماری‌زایی و قدرت تهاجم باکتری شیگلا بازی می‌کند. هدف از این مطالعه، همسانه سازی، توالی یابی ژن virG و ساخت سازه جهش یافته pGEM∆virG به منظور القای نوترکیبی در سویه شیگلا بومی با هدف ساخت سویه کاندید واکسنی زنده تقلیل حدت یافته است. روش بررسی: با استفاده از آزمون‌های بیوشیمیایی، سویه شیگلای بوم...
متن کاملشناسایی، همسانه سازی، تعیین توالی ژن virG و ایجاد سویه بومی تخفیف حدت یافته virGΔ با استفاده از سیستم λ Red recombinase
باکتری شیگلا و سویه های اشرشیا کلی مهاجم روده ای (EIEC) جزء خانواده با کتریهای گرم منفی و عامل مسری ترین اسهال باسیلی (شیگلوز) می باشند. ژن virG یکی از فاکتور های ضروری در آسیب زایی باکتری شیگلا است. پروتئین رمزگذاری شده توسط این ژن، بر روی غشای خارجی (OM) شیگلا قرار گرفته و به خانواده پروتئینهای خود منتقل شونده AT (Autotrnasporter) خارج سلولی در باکتریهای گرم منفی تعلق دارد. یکی از روشهای ساخ...
متن کاملطراحی و ساخت وکتور خودکشی pDS132-ΔkanR به منظور حذف ژن مقاومت به آنتی-بیوتیک کانامایسین در بروسلا ملی‌تنسیس سویه Rev1 جهش‌یافته برای تولید سویه کاندید واکسن
زمینه و اهداف: بروسلوز از مهمترین بیماری‌های مشترک انسان و دام محسوب می‌گردد. بهترین راه مقابله با بروسلوز انجام واکسیناسیون مناسب میباشد. واکسنهای موجود از قبیل واکسن Rev1 با معایبی چون سقط جنین در حیوانات باردار همراه است لذا تهیه واکسن مناسب برای درمان بروسلوز ضروری می باشد. هدف از انجام این مطالعه، طراحی و ساخت وکتور خودکشی pDS132-ΔkanR به منظور حذف ژن مقاومت به آنتیبیوتیک کانامایسین د...
متن کاملارزیابی واریته تخفیف حدت‌یافته نئوسپورا کنینوم به عنوان واکسن زنده تجربی در موش
تک‌یاخته نئوسپورا کانینوم (Neospora caninum)، به عنوان یکی از مهمترین عوامل عفونی بروز سقط جنین در گله‌های گاو در سراسر جهان شناخته می‌شود و از این طریق خسارات بالایی را به صنعت گاوداری در جهان وارد می‌آورد. در حال حاضر بیشترین توجه در تحقیقات جهانی به سوی واکسن زنده معطوف گردیده است؛ در این تحقیق با ارزیابی واریته نئوسپورا کانینوم موسسه رازی در قالب واکسن سعی شده واکسن مؤثرتری برای عفونت نئو...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
عنوان ژورنال:
مجله دانشگاه علوم پزشکی اراکجلد ۱۵، شماره ۲، صفحات ۳۵-۴۷
کلمات کلیدی
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023